聚合酶链反应(PCR)是分子生物学扩充DNA片段的非常简单和无处不在的方法。该项技术十分最重要,不仅用作基础研究,而且也在临床,法医和医疗中应用于。
定量动态PCR是一个改动后的版本,通过划归荧光标记来积累地测量DNA扩充,而不是在过程完结时展开检测,如在常规PCR中那样。因此动态PCR对初始的DNA模板的量脆弱,构建定量。然而,目前的技术因序列的错误,不精确融合,或荧光探针(杂交)的不公平融合等引入偏差。
一个名古屋大学研究小组现发展了测量动态DNA扩充的一个精致的方法,该方法是无标记的,从而防止了与其它操作者涉及的误差。研究及其成果公开发表于《科学报告》中。 现有无标记检测系统依赖靶分子的表面固定化,这是便宜、费力和无效率的。这种新方法也引进有序探针融合的杂交偏差的元件。
新的技术检测穿越微小200纳米(0.0002毫米)-长填满有分析试料的纳地下通道液体的激光束的强度的变化。532纳米的激光束由透镜探讨,然后散射通过穿越纳米地下通道由光电二极管检测到。二氧化硅基片用来制作纳米地下通道,较小的样品液体和二氧化硅的折射率之间的差,较小的是在散射光强度的变化,并且反之亦然。
“我们用于这种技术展开了人类乳头状瘤病毒和肺结核细菌的第一次无标签检测,”第一作者隆夫安井说道。“该方法是高度脆弱的,并且容许一个长范围的初始DNA浓度的定量,从1fM至1pM(1000倍范围),所以是高于现有的基于荧光的检测系统。
” “我们的系统在34℃的比较较低的温度下展开且需要热循环测量DNA扩充”,年出版者宣忠梶说道。“因为它有可能被结构为单个芯片,并且可以检测小体积样品为1微升,它比传统的探测器较少100-1,000倍,它是尤其适合于发展作为小型化临床和微生物的检测。
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